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      1. 加急見(jiàn)刊

        非洲豬瘟病毒K205R蛋白單克隆抗體的制備與鑒定

        趙亞茹; 韓蓉; 楊吉飛; 牛慶麗; 關(guān)貴全; 羅建勛; 劉光遠; 殷宏; GRZEGORZ; Wozniakowski; 劉志杰 中國農業(yè)科學(xué)院蘭州獸醫研究所家畜疫病病原生物學(xué)國家重點(diǎn)實(shí)驗室甘肅省動(dòng)物寄生蟲(chóng)病重點(diǎn)實(shí)驗室; 甘肅蘭州730046; Department; of; Swine; Diseases; National; Veterinary; Research; Institute; 24-100; Pulawy; Poland; 江蘇省動(dòng)物重要疫病與人獸共患病防控協(xié)同創(chuàng )新中心; 江蘇揚州225009

        摘要:將合成的非洲豬瘟病毒K205R基因序列插入pET-28a(+)表達載體,經(jīng)IPTG誘導表達pET-28a-K205R重組蛋白。用制備的重組抗原免疫BALB/c小鼠,采用化學(xué)融合方法融合、篩選,獲得了6A4、7F5和7G3三株抗K205R蛋白的雜交瘤細胞株。經(jīng)鑒定,這3株單克隆抗體(單抗)的亞類(lèi)均為IgG1型;單抗的腹水效價(jià)分別為1∶51200、1∶409600和1∶102400。將這3株雜交瘤細胞連續培養20代,在第20代仍有很高的分泌抗體的能力,表明其穩定性較好。Western-blot檢測結果表明,這3株單抗與K205R重組蛋白有良好的反應性和特異性。上述結果表明,本研究制備的這3株雜交瘤細胞株能夠穩定分泌抗體,分泌的抗體特異性高,為非洲豬瘟診斷技術(shù)的研究奠定了基礎。

        注: 保護知識產(chǎn)權,如需閱讀全文請聯(lián)系中國獸醫科學(xué)雜志社

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