豬繁殖與呼吸綜合征病毒N蛋白單克隆抗體的制備與鑒定
摘要:為了鑒定豬繁殖與呼吸綜合征病毒(PRRSV)N蛋白抗原表位,本研究將PRRSV N蛋白進(jìn)行了原核表達和純化,并用純化后的N蛋白免疫BALB/c小鼠。利用淋巴瘤細胞融合技術(shù)和間接ELISA抗體篩選方法,制備獲得4株穩定分泌單克隆抗體的雜交瘤細胞株3D10、3G12、6E2和6F4,Western-blot和IFA鑒定其均能與PRRSV特異性反應。4株單抗均屬于IgG1亞類(lèi),輕鏈均為κ鏈。ELISA結果顯示,3D10、3G12、6E2和6F4之間的疊加系數均在50%以上。選擇N蛋白3個(gè)主要抗原表位合成肽進(jìn)行ELISA檢測,證明4株單抗識別的抗原表位均為30~52 aa,提示4株單克隆抗體親和力可能存在一定差異,為該病毒研究提供了重要材料。
注: 保護知識產(chǎn)權,如需閱讀全文請聯(lián)系中國獸醫科學(xué)雜志社