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			加急見(jiàn)刊
		
        
		

		
		
        
			
        
				
				
				
        
					
					
        
						
						
        Vasorin蛋白特異單鏈DNA適配體的篩選與鑒定
        
						
        李慧; 王瑋; 丁紅梅; 董潔; 黃皚雪; 羅昭鋒; 李潔; 白琛俊; 李少華; 邵寧生  軍事科學(xué)院軍事醫學(xué)研究院軍事認知與腦科學(xué)研究所; 北京100850; 中國人民武裝警察部隊后勤學(xué)院生物化學(xué)與分子生物學(xué)教研室; 天津300309; 中國科學(xué)技術(shù)大學(xué); 安徽合肥230026
        

					
        
					
        摘要：目的：篩選能特異識別vasorin（VASN）蛋白的單鏈DNA（ss DNA）適配體并對其進(jìn)行鑒定。方法：利用SPRSELEX技術(shù)篩選VASN蛋白特異ss DNA適配體,通過(guò)基因克隆測序、MEME在線(xiàn)軟件和RNA structure軟件分析富集文庫序列并挑選出候選適配體序列,利用EMSA、ELISA、流式細胞術(shù)對候選適配體進(jìn)行特異性與親和力鑒定。結果：經(jīng)過(guò)5輪SELEX篩選,獲得了與VASN蛋白特異結合的ss DNA適配體富集文庫,合成候選適配體,經(jīng)EMSA和ELISA檢測分析,證實(shí)適配體V4-2能與VASN蛋白特異結合,而不與無(wú)關(guān)對照牛血清白蛋白結合,其平衡解離常數為281.3±103.7 nmol/L;流式細胞術(shù)證實(shí)V4-2能夠特異識別高表達VASN蛋白的Hep G2細胞。結論：篩選獲得特異識別VASN蛋白的ss DNA適配體V4-2。
        
					
        注: 保護知識產(chǎn)權,如需閱讀全文請聯(lián)系生物技術(shù)通訊雜志社
        
				
        
				

			
        
		
        

		
		

	
        

	
	
	
	
	
	
	
	


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