摘要：為探究sox9基因在大黃魚(yú)性別決定與分化過(guò)程中的作用,利用RACE方法克隆得到大黃魚(yú)sox9a和sox9b 2個(gè)基因,采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR(qRT-PCR)分析其在雌雄個(gè)體不同組織和不同發(fā)育階段的表達規律,并檢測了其在17β-雌二醇處理后的遺傳雄性和17α-甲基睪酮誘導處理后遺傳雌性幼魚(yú)中的表達變化。結果顯示,大黃魚(yú)sox9a c DNA全長(cháng)2 442 bp(NCBI登錄號:MH996431),包含476 bp 5′UTR、466 bp 3′UTR、1 500 bp ORF,編碼499個(gè)氨基酸。大黃魚(yú)sox9b cDNA全長(cháng)為2 199 bp(NCBI登錄號:MH996432),包含335 bp5′UTR、415 bp 3′UTR、1 449 bp ORF,編碼482個(gè)氨基酸。qRT-PCR分析顯示,sox9a基因主要在性腺、眼、腦、肝臟中表達,精巢中的表達量顯著(zhù)高于卵巢;sox9b在大黃魚(yú)各組織中廣泛表達,但以精巢中表達量最高,而卵巢中只有痕量表達。在魚(yú)苗性腺發(fā)育初期,sox9a/b的表達量都維持在較低水平;隨著(zhù)魚(yú)苗長(cháng)大,sox9a/b的表達量在84 dph、123 dph 2次達到高峰,隨后開(kāi)始下降,10 mph后又逐漸上升。17β-雌二醇處理能夠顯著(zhù)下調遺傳雄性大黃魚(yú)sox9a和sox9b基因在性腺中的表達,17α-甲基睪酮處理則顯著(zhù)上調遺傳雌性大黃魚(yú)sox9a和sox9b基因在性腺中的表達。研究表明,sox9a/b基因與大黃魚(yú)性別發(fā)育和分化過(guò)程密切相關(guān),對大黃魚(yú)精巢的發(fā)育與維持起重要的調控作用,而且兩個(gè)基因的功能可能具有一定程度的分化。

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