剪切力對成纖維細胞中p38和CREB活性影響和作用機制
摘要：目的探討剪切力對成纖維細胞中p38絲裂原活化蛋白激酶（p38MAPK）和環(huán)磷腺苷效應元件結合蛋白（CREB）活性影響及其調控機制.方法將成纖維細胞傳代于培養皿中,細胞貼壁后采用不同作用時(shí)間和強度的剪切力（Shear stress）作用于成纖維細胞.為了探索剪切力作用的機制,分別加入活性氧（ROS）抑制劑過(guò)氧化氫酶和鈣離子螯合劑BAPTA預處理成纖維細胞,剪切力作用30min后收集細胞.采用免疫印跡方法分別檢測細胞中p38、CREB的活性.結果剪切力呈時(shí)間和強度依賴(lài)性方式促進(jìn)成纖維細胞中p38、CREB磷酸化升高;在5dyn/cm2強度下,p38和CREB活性在10～30min時(shí)段逐步升高;在剪切力5dyn/cm2和7dyn/cm2作用30min后,p38和CREB的磷酸化水平均出現明顯升高.ROS抑制劑Catalase抑制剪切力作用下成纖維細胞p38和CREB磷酸化,而鈣離子螯合劑BAPTA增強p38和CREB磷酸化.結論剪切力通過(guò)ROS途徑促進(jìn)成纖維細胞中p38和CREB的磷酸化.
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