一種改進(jìn)的非酶處理分離新鮮腎癌組織中浸潤淋巴細胞的方法
摘要:目的建立一種快速簡(jiǎn)便的不經(jīng)過(guò)消化酶處理而直接分離、純化新鮮腎癌組織浸潤淋巴細胞的新方法。方法手術(shù)切除的新鮮腎癌組織經(jīng)過(guò)機械剪碎、溫和勻漿處理制備成單細胞懸液,再通過(guò)Ficoll密度梯度離心分離腫瘤浸潤淋巴細胞,密度梯度分離后經(jīng)CD3磁珠分選純化。結果成功建立了快速從新鮮腎癌組織分離腫瘤浸潤淋巴細胞的新方法,成功完成7例組織分離。分析結果顯示CD3^+T細胞占(24.10±17.60)%,CD4^+和CD8^+細胞分別占(37.69±9.83)%、(37.86±10.47)%;進(jìn)一步經(jīng)磁珠純化后CD3^+T細胞純度達91.6%,適用于后續分析。結論本法優(yōu)勢在于:①與酶消化法相比,有利于保護細胞膜表面受體,最大程度全面反映腫瘤組織中淋巴細胞亞群的浸潤情況;②短暫、快速、溫和勻漿處理,操作時(shí)間短,有利于維持細胞的高活力。
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