磷酸水解酶對大腸桿菌工程菌合成番茄紅素的影響
摘要：實(shí)驗以大腸桿菌DH1為宿主菌，在已有生產(chǎn)番茄紅素大腸桿菌工程初始菌株lyc001的基礎上，增加合成番茄紅素途徑中的關(guān)鍵基因crtEIB拷貝數；表征結果表明，相較于初始菌lyc001，番茄紅素產(chǎn)量提高了34％，并將此菌命名為lyc011．利用CRISPR干擾（CRISPR interference，CRISPRi）原理以及Golden-Gate組裝方法成功構建了可以靶向得到的57個(gè)磷酸水解酶基因的雙single guide RNA（sgRNA）的質(zhì)粒．將dCas9質(zhì)粒和sgRNA表達質(zhì)粒導入lyc011菌株中，通過(guò)下調這57個(gè)磷酸水解酶基因表達量，最終通過(guò)發(fā)酵表征成功篩選到了15個(gè)對番茄紅素產(chǎn)量提高具有正向調節結果的磷酸水解酶基因，分別為：yjjG，aphA，nagD，yqaB，yidA，pphA，bacA，glpQ，pgpB，spoT，cpdB，nudd，dgt，phoQ．
注: 保護知識產(chǎn)權,如需閱讀全文請聯(lián)系安徽工程大學(xué)學(xué)報雜志社
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