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			加急見(jiàn)刊
		
        
		

		
		
        
			
        
				
				
				
        
					
					
        
						
						
        融合表達白細胞介素10與卵清蛋白重組腺病毒口服變應原疫苗的構建及鑒定
        
						
        馬仕坤; 關(guān)劍; 王丹; 甄宏楠; 謝喜秀  中國醫學(xué)科學(xué)院北京協(xié)和醫學(xué)院北京協(xié)和醫院變態(tài)(過(guò)敏)反應科過(guò)敏性疾病精準診療研究北京市重點(diǎn)實(shí)驗室; 北京100730; 中國醫學(xué)科學(xué)院北京協(xié)和醫學(xué)院北京協(xié)和醫院婦產(chǎn)科; 北京100730; 中國醫學(xué)科學(xué)院北京協(xié)和醫學(xué)院北京協(xié)和醫院放療科; 北京100730; 中國醫學(xué)科學(xué)院北京協(xié)和醫學(xué)院腫瘤醫院病理科; 北京100021; 中國科學(xué)院過(guò)程工程研究所; 北京100190
        

					
        
					
        摘要：目的構建免疫調節因子白細胞介素（IL）-10與模式變應原卵清蛋白（OVA）融合表達的重組腺病毒載體口服疫苗。方法直接合成雞IL-10及OVA的DNA序列后,采用重疊PCR法進(jìn)行連接。連接序列插入穿梭質(zhì)粒p HBAd-MCMV的多克隆區,獲得重組穿梭質(zhì)粒p Ad IL-10-OVA。經(jīng)測序鑒定后,p Ad IL-10-OVA與腺病毒骨架質(zhì)粒p HBAd-BHG共轉染293細胞,包裝獲得重組腺病毒Ad IL-10-OVA原代病毒,將原代病毒在293細胞中擴增到合適滴度。采用ELISA法檢測細胞上清液中融合蛋白的表達水平。結果重組穿梭質(zhì)粒插入目標序列經(jīng)測序鑒定正確,重組腺病毒載體疫苗r Ad IL-10-OVA在293細胞中成功表達。結論成功構建了融合表達IL-10與OVA的重組腺病毒載體疫苗Ad IL-10-OVA,為后續動(dòng)物實(shí)驗驗證其對變態(tài)反應性疾病的防治效應奠定了基礎。
        
					
        注: 保護知識產(chǎn)權,如需閱讀全文請聯(lián)系中華臨床免疫和變態(tài)反應雜志社
        
				
        
				

			
        
		
        

		
		

	
        

	
	
	
	
	
	
	
	


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