疏水蛋白HGFI用于載基因組織工程支架的研究
摘要：以具有兩親性的疏水蛋白HGFI為基礎,通過(guò)正負電荷的相互作用將質(zhì)粒與PEI的復合體固定在了修飾有疏水蛋白HGFI的PCL支架材料上.對不同時(shí)間段釋放的質(zhì)粒進(jìn)行了定量測量并繪制曲線(xiàn),結果表明載基因支架上的基因有四分之三左右在固定的12 h內釋放.用載基因支架進(jìn)行體外293T的轉染實(shí)驗,載基因支架的轉染效率為21.76%.該轉染效率與直接用轉基因試劑對貼壁細胞轉染的效率低很多,但對于組織工程支架來(lái)說(shuō),已具有一定的基因遞送功能.大鼠皮下埋植實(shí)驗表明,在體內埋植3 d后,載基因支架有著(zhù)良好的體內轉染效果,對體內的轉基因陽(yáng)性細胞進(jìn)行初步檢測發(fā)現,支架埋植初期有大部分被轉染細胞為巨噬細胞,而對巨噬細胞進(jìn)行轉染是否對組織修復有益還需進(jìn)一步的研究.大鼠皮下埋植2 w后,對埋植的材料進(jìn)行血管化的檢測,組織切片進(jìn)行vWF免疫熒光染色和成像,成像結果說(shuō)明載基因支架顯著(zhù)地促進(jìn)了支架材料在體內的血管新生,推測支架上固定的質(zhì)粒在體內轉染后表達出了目的蛋白e NOS,從而促進(jìn)了支架材料周?chē)M織的血管化.本實(shí)驗中,載基因支架的轉染效率還需進(jìn)一步提高,體內轉基因陽(yáng)性細胞的種類(lèi)還需進(jìn)行進(jìn)一步鑒定,功能蛋白eNOS的表達和檢測還需要進(jìn)一步的研究.
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