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			加急見(jiàn)刊
		
        
		

		
		
        
			
        
				
				
				
        
					
					
        
						
						
        基于RT-HDA等溫擴增技術(shù)快捷檢測H7N9禽流感病毒的方法研究
        
						
        方斌; 劉琳琳; 李翔; 余曉; 葉國軍; 江永忠
        

					
        
					
        摘要：常規PCR方法不適宜于實(shí)驗條件不足的基層現場(chǎng)檢測H7N9禽流感病毒,不利于疑似病例的及時(shí)診治。本研究旨在建立一種快速簡(jiǎn)便、高靈敏度、低成本的H7N9禽流感病毒快速核酸檢測技術(shù)。選用H7N9禽流感病毒血凝素(Hemagglutinin,HA)基因作為靶標區域設計引物,采用FITC和Biotin標記上下游引物,通過(guò)逆轉錄解旋酶依賴(lài)性等溫擴增(Reverse transcription helicase-dependent isothermal amplification,RT-HDA)技術(shù)擴增病毒RNA,輔以膠體金免疫層析試紙檢測核酸擴增產(chǎn)物,建立H7N9禽流感病毒等溫擴增檢測方法。采用H7N9禽流感病毒質(zhì)粒和病毒培養物對該方法的靈敏性、特異性和重復性進(jìn)行評價(jià),結果顯示:病毒最低檢測限20個(gè)拷貝數/μL,與常規PCR方法相比較無(wú)明顯差異,重復性試驗一致,與其他型別的禽流感、流感病毒無(wú)交叉反應。本研究建立的RT-HDA聯(lián)合膠體金免疫層析試紙檢測H7N9禽病毒檢測方法具有較好的靈敏度、特異性和重復性,特別適用于現場(chǎng)條件下檢測H7N9禽流感病毒快速簡(jiǎn)便的檢測。
        
					
        注: 保護知識產(chǎn)權,如需閱讀全文請聯(lián)系病毒學(xué)報雜志社
        
				
        
				

			
        
		
        

		
		

	
        

	
	
	
	
	
	
	
	


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