橡膠樹(shù)HbMVK啟動(dòng)子的克隆與缺失表達分析
摘要:為了研究橡膠MVK基因啟動(dòng)子精細結構及功能,筆者利用PCR技術(shù)對橡膠樹(shù)HbMVK基因啟動(dòng)子進(jìn)行了克隆,并對其進(jìn)行了生物信息學(xué)分析。結果表明,該啟動(dòng)子序列全長(cháng)1 696 bp,包含CAAT-box,TATAbox,CAT-box,LTR,GARE-motif,TCA-element等元件。此外,根據元件分布,構建橡膠樹(shù)HbMVK基因啟動(dòng)子系列缺失和全長(cháng)序列表達載體并轉化擬南芥。T2代轉基因擬南芥中,報告基因GUS組織化學(xué)染色結果表明:HbMVK啟動(dòng)子全長(cháng)序列和5'端-1 386 bp缺失,HbMVK啟動(dòng)子驅動(dòng)的GUS基因只在轉基因擬南芥實(shí)生苗胚軸中有極微弱表達。5'端-1 221 bp和-725 bp缺失,HbMVK啟動(dòng)子驅動(dòng)GUS基因表達的活性較強,而5''端-325bp缺失,HbMVK啟動(dòng)子則完全失去活性,這表明啟動(dòng)子核心調控元件位于-725 bp到-325 bp之間。
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