逆轉錄重組酶介導擴增技術(shù)快速檢測基孔肯雅熱病毒
摘要:本研究通過(guò)使用逆轉錄酶,將基孔肯雅熱病毒RNA首先逆轉錄為cDNA。選取基孔肯雅熱病毒保守序列設計引物及探針,建立基孔肯雅熱病毒重組酶介導一步法等溫核酸擴增RT—RAA(Reverse transcription recombinase aided amplification,RT-RAA)快速檢測法,并分析其靈敏度及特異性。結果顯示,該方法整個(gè)過(guò)程在39℃進(jìn)行,檢測時(shí)間短(〈20min),檢測下限可達100copy,并與黃熱病毒、日本乙型腦炎病毒、西尼羅病毒、登革病毒I型等蚊媒病毒不存在交叉反應。本文建立的基孔肯雅熱病毒RT—RAA檢測法,靈敏度高、特異性強、操作簡(jiǎn)便,適應于口岸基層基孔肯雅熱病毒的快速檢測。
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