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			加急見(jiàn)刊
		
        
		

		
		
        
			
        
				
				
				
        
					
					
        
						
						
        登革2型病毒E蛋白基因的酵母表達
        
						
        劉美德; 冀霞; 余張; 楊正國; 羅森; 趙瑞君; 趙彤言  軍事科學(xué)院軍事醫學(xué)研究院微生物流行病研究所; 北京100071; 山西醫科大學(xué)病原生物學(xué)教研室; 太原030001; 貴陽(yáng)醫科大學(xué)基礎學(xué)院; 貴陽(yáng)550004; 北京市疾病預防控制中心北京市預防醫學(xué)研究中心; 北京100013
        

					
        
					
        摘要：為研究登革病毒與蚊蟲(chóng)相互作用的分子機制，本研究對DENV-2的E蛋白基因進(jìn)行了畢赤酵母分泌表達。首先，經(jīng)RT—PCR方法克隆DENV-2的E蛋白基因，將克隆的基因與表達載體pPICZaB連接以構建表達重組子；并經(jīng)酶切、PCR、測序篩選實(shí)驗鑒定正確重組子。然后，重組子經(jīng)氯化鋰法轉化畢赤酵母菌KM71H獲得轉化子；經(jīng)抗生素、表型鑒定、PCR篩選得到Muts型的多拷貝轉化子。最后，經(jīng)甲醇誘導基因表達，Western—blotting方法鑒定蛋白表達情況及最佳表達時(shí)間。本研究對DENV-2的E蛋白成功進(jìn)行了分泌表達，并且確定其表達最佳發(fā)酵時(shí)間為96h；為進(jìn)一步研究登革病毒與蚊蟲(chóng)相互作用的分子機制奠定了基礎。
        
					
        注: 保護知識產(chǎn)權,如需閱讀全文請聯(lián)系寄生蟲(chóng)與醫學(xué)昆蟲(chóng)學(xué)報雜志社
        
				
        
				

			
        
		
        

		
		

	
        

	
	
	
	
	
	
	
	


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