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			加急見(jiàn)刊
		
        
		

		
		
        
			
        
				
				
				
        
					
					
        
						
						
        埃及伊蚊絲氨酸蛋白酶抑制劑23的基因克隆表達與多克隆抗體制備
        
						
        翟慧; 王政艷; 呂清巧; 程金芝; 李世琪; 楊茜; 商正玲; 吳家紅  貴州醫科大學(xué)環(huán)境污染與疾病監控省部共建教育部重點(diǎn)實(shí)驗室貴州醫科大學(xué)現代病原生物學(xué)實(shí)驗室貴州醫科大學(xué)基礎醫學(xué)院; 貴陽(yáng)550025
        

					
        
					
        摘要：埃及伊蚊serpin23（絲氨酸蛋白抑制劑23）在雌蚊唾液腺特異高表達，是蚊蟲(chóng)唾液組分的主要蛋白之一。本文設計特異性引物序列，采用RT—PCR技術(shù)擴增獲得埃及伊蚊廣東電白株serpin23成熟肽序列，構建重組表達質(zhì)粒pET-28a（＋）-serpin23并測序驗證。經(jīng)IPTG誘導表達、KCl染色、切膠純化獲取了目的蛋白；制備了小鼠特異性抗serpin23蛋白多克隆抗體。結果顯示：獲得serpin23成熟肽序列，全長(cháng)1197bp，編碼399個(gè)氨基酸。等電點(diǎn)pI為6．13，具有serpin結構域和一個(gè)功能未知的FAINT結構域。pET-28a（＋）-serpin23重組質(zhì)?？杀磉_了大小約為47kDa、以包涵體表達為主的融合蛋白。Western Blot結果證明serpin23重組蛋白可以與抗-His標簽和抗-serpin23抗體發(fā)生免疫反應，約47kDa處產(chǎn)生特異性條帶。本研究成功獲得了埃及伊蚊廣東電白株serpin23重組表達蛋白和抗serpin23多克隆抗體，為后續功能研究奠定基礎。
        
					
        注: 保護知識產(chǎn)權,如需閱讀全文請聯(lián)系寄生蟲(chóng)與醫學(xué)昆蟲(chóng)學(xué)報雜志社
        
				
        
				

			
        
		
        

		
		

	
        

	
	
	
	
	
	
	
	


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