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			加急見(jiàn)刊
		
        
		

		
		
        
			
        
				
				
				
        
					
					
        
						
						
        SUMO-TAT-Klf4融合蛋白的原核表達及純化
        
						
        鐘美娟; 張華華; 項麗; 周汝濱; 曹定國; 梁朋; 張國平; 何滔; 龐實(shí)鋒  廣東醫科大學(xué)基礎醫學(xué)院生物學(xué)教研室; 東莞523808
        

					
        
					
        摘要：Klf4是體細胞誘導成多能干細胞的重要轉錄因子之一,參與細胞增殖分化。本研究通過(guò)將小鼠Klf4基因、穿膜肽TAT以及小分子泛素樣修飾蛋白SUMO融合并轉入大腸桿菌Rosseta(DE3)中進(jìn)行表達,經(jīng)PCR鑒定和酶切驗證后,用IPTG誘導后表達出約78kD的融合蛋白,利用Ni-NTA親和層析膠純化獲得了高質(zhì)量的SUMO-TAT-Klf4蛋白,使用Western blotting檢測顯示特異性良好。本研究成功構建了pET3c-SUMO-TAT-Klf4原核表達載體,有利于獲得大量的Klf4蛋白,并以期提高其穿透細胞膜的能力,為后續利用重編程因子融合蛋白誘導體細胞成為iPS細胞奠定基礎。
        
					
        注: 保護知識產(chǎn)權,如需閱讀全文請聯(lián)系基因組學(xué)與應用生物學(xué)雜志社
        
				
        
				

			
        
		
        

		
		

	
        

	
	
	
	
	
	
	
	


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