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			加急見(jiàn)刊
		
        
		

		
		
        
			
        
				
				
				
        
					
					
        
						
						
        馬氏珠母貝(Pinctada fucata martensii)Pm-HSP70基因的克隆及其對溫度脅迫的響應
        
						
        劉雅; 王慶恒; 鄭哲; 焦鈺; 李利二; 杜曉東  廣東海洋大學(xué)水產(chǎn)學(xué)院; 湛江524088; 廣東省珍珠養殖與加工工程技術(shù)研究中心; 湛江524088; 徐聞縣銀輝珍珠養殖農民專(zhuān)業(yè)合作社; 湛江524088
        

					
        
					
        摘要：本實(shí)驗利用RACE技術(shù)克隆獲得了馬氏珠母貝HSP70 (Pm-HSP70)基因,并對其基因和氨基酸序列結構特征進(jìn)行了生物信息學(xué)分析,同時(shí)采用熒光定量PCR技術(shù)分析了該基因在不同組織的表達模式及不同溫度下的時(shí)序表達模式。序列分析表明,Pm-HSP70 cDNA序列全長(cháng)為2 215 bp,其中開(kāi)放式閱讀框1 899 bp,5’UTR 107 bp,3’UTR 209 bp,編碼632個(gè)氨基酸,理論蛋白分子量為69.44 kD,理論等電點(diǎn)為5.61。該蛋白具有HSP70家族典型的結構域HSP70,以及ATP結合位點(diǎn)、細胞質(zhì)特征性保守序列和3個(gè)HSP70家族標簽。多序列比對結果表明Pm-HSP70與菲律賓蛤仔HSP70同源性最高,為80%;系統進(jìn)化分析發(fā)現,Pm-HSP70與菲律賓蛤仔等貝類(lèi)HSP70聚為一支。組織表達定量分析結果顯示,Pm-HSP70在馬氏珠母貝多個(gè)組織中均有表達,在肝胰腺中表達量最高,其次是性腺;對不同溫度下鰓組織中Pm-HSP70的時(shí)序表達分析發(fā)現,在處理后各時(shí)間點(diǎn)高溫組(32℃)基因表達水平最高,且均顯著(zhù)高于對照組(22℃)和低溫組(17℃)。以上結果表明Pm-HSP70可能參與馬氏珠母貝的高溫脅迫響應。該研究為進(jìn)一步探索Pm-HSP70在馬氏珠母貝溫度適應性中的作用提供了基礎資料。
        
					
        注: 保護知識產(chǎn)權,如需閱讀全文請聯(lián)系基因組學(xué)與應用生物學(xué)雜志社
        
				
        
				

			
        
		
        

		
		

	
        

	
	
	
	
	
	
	
	


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