金線(xiàn)蘭根莖葉內參基因的篩選
摘要:為了篩選金線(xiàn)蘭根莖葉最合適的內參基因,本研究使用實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù),以不同發(fā)育階段的金線(xiàn)蘭的根、莖、葉為材料,使用GeNorm、NormFinder和RefFinder軟件分析5個(gè)備選基因(26SrRNA,ACT-1, ACT-2, UBQ, EF-1α)的穩定性和差異表達情況,篩選合適的內參基因。結果顯示,不同營(yíng)養器官和生長(cháng)時(shí)期的內參基因表達穩定性有一定差別:(1)在營(yíng)養器官組織中,葉的最合適內參基因為EF-1α,根的為UBQ與EF-1α,莖的為ACT-1;(2)在不同生長(cháng)發(fā)育階段中,2個(gè)月樣品的最合適內參基因為26SrRNA,4個(gè)月為UBQ與EF-1α。綜合以上結果表明在分析金線(xiàn)蘭基因差異表達時(shí),適合的內參基因是EF-1α,內參基因組合則可選擇EF-1α與26SrRNA。本研究為金線(xiàn)蘭后續相關(guān)研究提供參考。
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