應用酵母雙雜交系統篩選GbVWR互作蛋白
摘要:前期研究表明海島棉(Gossypium barbadense)GbVWR(Verticillium wilt resistance)基因參與了棉花抗黃萎病反應,但其抗病機制尚不清楚。本試驗利用酵母雙雜交系統篩選GbVWR互作蛋白,并通過(guò)對互作關(guān)系的分析初步探討其介導的棉花抗病機制。結果表明:本研究成功構建了酵母雙雜交誘餌載體pGBKT7-GbVWR,并利用PEG/LiAc法將其轉化至酵母菌株Y2HGold感受態(tài)細胞中,結果顯示重組質(zhì)粒無(wú)自激活活性及毒性;用攜帶誘餌載體pGBKT7-GbVWR的酵母菌株與黃萎病誘導的海島棉Pima90-53酵母雙雜交cDNA文庫進(jìn)行雜交,通過(guò)PCR、測序和數據庫比對分析插入的基因片段,共篩選到24個(gè)與GbVWR潛在互作的蛋白,為進(jìn)一步探明GbVWR的抗病功能提供了理論依據。
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