中醫濕證代謝研究

來(lái)源:投稿網(wǎng) 時(shí)間:2022-12-05 10:00:04

代謝組學(xué)在中醫證候本質(zhì)研究中的應用。

中醫證候是一種復雜的生活現象。近年來(lái)誕生的代謝組學(xué)不僅能反映生物的功能水平，還能精細測量代謝物。融入當前系統生物學(xué)的學(xué)術(shù)內涵將是中醫證候學(xué)的必然趨勢。隨著(zhù)后基因組時(shí)代的到來(lái)，分子生物學(xué)作為現代生命科學(xué)的前沿學(xué)科，為中醫證候學(xué)的本質(zhì)研究提供了新的研究思路和技術(shù)平臺。利用代謝組學(xué)的最新現代技術(shù)，探討中醫證候學(xué)的本質(zhì)內涵，為微觀(guān)解讀中醫證候學(xué)的本質(zhì)提供了可能性，為中醫證候學(xué)的現代研究開(kāi)辟了新的研究領(lǐng)域。因此，我查閱了近10年的相關(guān)文獻，總結了以下代謝組學(xué)在中醫證候學(xué)本質(zhì)研究中的應用概況。

2.1腎陽(yáng)虛證。

董飛霞等[8]選擇60例慢性腎病患者（30例腎陽(yáng)虛患者，30例非腎陽(yáng)虛患者）和30名健康志愿者進(jìn)行體檢，并采用尿液代謝組學(xué)指紋譜法進(jìn)行研究。結果表明，慢性腎病三期與正常樣本代謝模式的差異非常明顯，建立的預測能力也非常強。25種不同代謝物排序后，標準產(chǎn)品識別差異物質(zhì)的關(guān)鍵代謝成分是丙氨酸、胺丙二酸二乙酯等物質(zhì)，明確改變方向和代謝方式，可以很好地區分腎陽(yáng)虛證與非腎陽(yáng)虛證的差異。楊麗萍等[9]利用代謝組學(xué)研究發(fā)現，腎陽(yáng)虛模型動(dòng)物的代謝網(wǎng)絡(luò )明顯偏離正常組動(dòng)物，經(jīng)溫陽(yáng)中藥干預后，模型動(dòng)物的代謝譜恢復到正常范圍，呈現網(wǎng)絡(luò )修復的結果。

2.2虛寒證。

徐斌等[10]觀(guān)察大鼠灌胃給龍膽水煎劑（RGD）后尿液代謝譜的變化及其與龍膽寒性作用的相關(guān)性。核磁共振氫譜（[1H]NMR）數據顯示，RGD組和對照組在主要成分分析得分圖中呈聚類(lèi)分布，兩組之間沒(méi)有重疊。RGD組尿樣中葡萄糖和氨基酸顯著(zhù)增加，?；撬岷偷跞装凤@著(zhù)減少。長(cháng)期給予大劑量RGD可使大鼠出現虛寒證體征。給藥后尿[1H]NMR譜的變化與龍膽寒性作用有關(guān)。

2.3寒證和熱證。

王江山等[11]采用基于超高效液相色譜-時(shí)間飛行質(zhì)譜(UPLC-Q-TOF)的血漿代謝組學(xué)方法，分析類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節炎(RA)的疾病分類(lèi)。因此，RA的不同病程(穩定期和活動(dòng)期)和中醫特定證候(冷證和熱證)可以明顯區分。因此，代謝組學(xué)在闡明中醫理論、促進(jìn)中醫與現代醫學(xué)交流方面具有廣泛的應用前景。2.4血熱證。

劉偉紅等[12]采用核磁共振譜技術(shù)，分析了53例銀屑病血熱證治療前后與31例健康志愿者血漿代謝產(chǎn)物譜的差異。結果表明，銀屑病血熱證患者可以明顯區分健康對照組，銀屑病血熱證治療前后也可以更好地區分。冷血解毒湯可調節銀屑病血熱證患者的糖脂代謝，使其代謝網(wǎng)絡(luò )呈現出修復正常狀態(tài)的趨勢。因此，代謝組學(xué)方法可以更全面地反映生物體的生理病理和代謝狀態(tài)，并可應用于功效評價(jià)研究。

2.5肝火亢盛證、痰濕雍盛證、陰虛陽(yáng)亢證。

陸益紅等[13]探討了原發(fā)性高血壓辨證分型與基于GC/MS血清代謝組學(xué)的關(guān)系。GC/MS用于確定健康人和原發(fā)性高血壓患者的血清內源性代謝物。分析其代謝譜后，表明健康人與高血壓患者的血清代謝譜有明顯差異。上述三種類(lèi)型的高血壓可以清晰區分，也可以顯示高血壓的發(fā)展過(guò)程?？梢钥闯?，基于GC/MS和模式識別的代謝組學(xué)技術(shù)在揭示中醫理論本質(zhì)上具有廣泛的應用前景，是探索證候物基礎的更合適手段。

2.6肝郁脾虛證。

[14]4]討論慢性束縛應激老鼠（肝郁脾虛模型）血漿代謝表型的變化。通過(guò)對慢性束縛應激老鼠血漿1HNMR譜的分析，表明每組老鼠血漿1HNMR代謝譜之間存在差異，可以從代謝組分析中找到特定的標志性代謝物，解釋中醫肝郁脾虛證候的生物學(xué)本質(zhì)，探討代謝組學(xué)在中醫證候學(xué)研究中的應用。因此，代謝組分析是一種具有良好發(fā)展前景的中醫證候學(xué)研究方法。

2.7痰瘀證。

劉偉紅等[15]探討了痰瘀證候的動(dòng)態(tài)演變、時(shí)相特征和痰瘀代謝的變化。對高脂血癥模型鼠血漿1HNMR譜的分析顯示，每組鼠代謝譜不同。隨著(zhù)模型時(shí)間的延長(cháng)，不同時(shí)點(diǎn)模型組鼠的代謝譜也不同，表明高脂血癥早期以脂質(zhì)代謝紊亂為特征。隨著(zhù)病程的進(jìn)展，參與血液凝固過(guò)程的乙酰糖蛋白表明凝血機制異常，酮體和乳酸的升高表明脂質(zhì)代謝紊亂進(jìn)一步加重。因此，可以從代謝組學(xué)分析中找出痰瘀演變過(guò)程的特殊標志性代謝物，以解釋中醫痰瘀證候的生物學(xué)本質(zhì)。

2.8痰阻心脈證，氣陰兩虛證。

王廣基等[16]基于GC-TOF/MS代謝組學(xué)方法，全面檢測痰阻心脈和氣陰兩虛型冠心病患者血漿中小分子化合物，探索血漿內源性化合物的差異。結果表明，代謝組學(xué)方法可以區分這兩種冠心病和健康組。此外，這兩種類(lèi)型之間多種內源性代謝物的含量明顯不同，與能量、氨基酸和核苷酸代謝異常有關(guān)?？梢钥闯?，代謝組學(xué)的整體數據和標志物信息顯示了痰阻心脈和氣陰兩虛型冠心病的差異，表明代謝組學(xué)研究的體內小分子化合物可能是中醫分型的物質(zhì)基礎。

2.9氣虛血瘀證。

李林等[17]利用核磁共振氫譜法研究氣虛血瘀證老鼠對正常老鼠尿的組成變化，發(fā)現甲酸、肌氨酸酐、α-酮戊二酸、檸檬酸等成分含量發(fā)生了變化，為進(jìn)一步提示氣虛血瘀證的生成機制和疾病治療提供了證據。此外，GC-MS研究了氣虛血瘀證小豬血漿樣本[18]，甘油、醋酸、肌醇、氨基酸、胸氨酸等脂質(zhì)代謝物的代謝水平顯著(zhù)提高，葡萄糖、氨基酸和脂質(zhì)代謝物的含量顯著(zhù)降低?？梢钥闯?，該代謝模式可用于臨床診斷和治療慢性心肌缺血，也可為中醫氣虛血瘀證的研究提供新的思路。

2.10濕證。

本課題組中醫濕證代謝研究，如慢性腎功能衰竭中醫濕證尿液代謝組學(xué)研究、慢性胃炎中醫濕證舌苔液代謝組學(xué)研究等，采用色譜-質(zhì)譜聯(lián)用方法進(jìn)行研究，得出相應的代謝產(chǎn)物UGO/MC基于各種代謝組學(xué)方法對醫學(xué)證候的本質(zhì)研究，總結其優(yōu)缺點(diǎn)如下。核磁共振譜(NMR)和色譜-質(zhì)譜聯(lián)用是中醫證候本質(zhì)研究的兩種常用方法。核磁共振譜法非常適合研究代謝物中的復雜成分。核磁共振氫譜([1H]NMR譜)是最常用的。NMR法非常實(shí)用，預處理生物樣品快捷簡(jiǎn)單；它可以檢測整個(gè)動(dòng)物或人體特定器官細胞中的代謝物組，而無(wú)損傷。但缺點(diǎn)是靈敏度低。色譜-聯(lián)用，如超高液相色譜-間飛行質(zhì)譜(MCS)和QCS。定性和定量分析生物樣本中復雜代謝物中的各種成分，無(wú)偏差，高效快捷，靈敏度高。然而，每種色譜-質(zhì)譜聯(lián)合技術(shù)都有其缺點(diǎn)。GC-MS預處理過(guò)程繁瑣，衍生方法復雜，GC分離效率低；LC-MS缺乏譜圖數據庫，難以識別化合物的結構；GC-TOF/MS的數據處理非常復雜，不易靈活使用。