摘要：目的 探討不同擴增方法和探針長(cháng)度對植入前單個(gè)卵裂球比較基因組雜交（comparativegenomic hybridization，CGH）檢測結果的影響，為植入前產(chǎn)前診斷奠定基礎。方法隨機將20枚植入前6～8細胞期胚胎卵裂球分為A和B組（各10枚），取1名正常男性外周血20枚淋巴細胞，分為C和D組（各10枚）作為對照。A和c組經(jīng)簡(jiǎn)并寡聚核苷酸聚合酶鏈反應（degenerate oligonueleotide primedpolymerase chainreaction，DOPPCR）、B和D組經(jīng)多重置換擴增（multiple displacement amplification，MDA）分別進(jìn)行全基因組擴增（wholegenomeamplification，WGA），用上述全基因組擴增產(chǎn)物進(jìn)行PCR擴增TBX1基因2號外顯子，驗證其特異性。將獲得的WGA產(chǎn)物制備成250～750bp和750～2000bp2種不同長(cháng)度的探針與正常男性中期染色體核型進(jìn)行雜交，Y染色體性別決定區（sex—determiningregionofY，SRY）基因驗證CGH檢測結果。結果（1）用DOP—PCR擴增時(shí)，A組10枚卵裂球中有9枚WGA成功，C組10枚淋巴細胞WGA均成功；但其擴增產(chǎn)物進(jìn)一步擴增TBX1基因2號外顯子時(shí)，出現較多非特異性條帶。CGH檢測中，5例卵裂球用長(cháng)度250～750bp的探針檢測時(shí)，1例失敗，1例CGH軟件核型分析結果與SRY結果不一致。（2）經(jīng)MDA的B和D組，均WGA成功；其產(chǎn)物進(jìn)一步擴增TBX1基因2號外顯子時(shí)，非特異性條帶少。CGH檢測中，探針長(cháng)度為250～750bp的5例卵裂球均檢測成功，且與SRY驗證結果一致。（3）用長(cháng)度為750～2000bp探針檢測時(shí)，雜交效果不好。結論單卵裂球全基因組擴增，MDA較DOPPcR方法穩定，特異性強，CGH檢測中，擴增產(chǎn)物酶切至250～750bp制備的探針雜交圖像均勻、清晰，軟件分析核型結果穩定、準確。

注: 保護知識產(chǎn)權,如需閱讀全文請聯(lián)系中華圍產(chǎn)醫學(xué)雜志社