過(guò)表達SOX7對膽囊癌GBC-SD細胞增殖生物學(xué)特性的影響及其機制研究
摘要:目的探討過(guò)表達SOX7(Sex determining region Y-box 7)基因對膽囊癌GBC-SD細胞株增殖、凋亡的影響及其可能涉及的細胞信號通路。方法用特異性的重組質(zhì)粒pc DNA3.1-SOX7作為實(shí)驗組轉染GBC-SD細胞建立穩定過(guò)表達SOX7基因的細胞,空載體pc-DNA3.1-mock作為對照組。采用Edu細胞熒光染色法檢測過(guò)表達SOX7基因對GBCSD細胞增殖的影響,同時(shí)采用Hoechst 33342細胞染色法檢測GBC-SD細胞的凋亡。Western blot檢測相關(guān)信號通路蛋白的表達。結果實(shí)驗組中SOX7 mRNA的相對表達量為(353.0±28.1)%,相對于對照組(100.0±2.3)%表達明顯增加,差異具有統計學(xué)意義(P〈0.05)。對照組細胞在450 nm吸光度值為(4.6±0.4),較實(shí)驗組(2.4±0.2)明顯升高,差異具有統計學(xué)意義(P〈0.05)。Edu免疫熒光染色結果表明,對照組細胞增殖比例(33.3±3.4)%高于實(shí)驗組(12.2±4.2)%,差異具有統計學(xué)意義(P〈0.05)。Hoechst 33342細胞凋亡熒光染色結果表明,對照組細胞凋亡比例(5.2±1.3)%較實(shí)驗組(10.2±2.4)%降低,差異具有統計學(xué)意義(P〈0.05)。Western blot實(shí)驗結果表明,對照組PTEN蛋白的相對表達量為(0.2±0.02),而實(shí)驗組的相對表達量為(0.7±0.04),對照組磷酸化Akt的相對表達量為(0.8±0.03),而實(shí)驗組為(0.4±0.02),差異具有統計學(xué)意義(P〈0.05)。結論過(guò)表達SOX7基因能顯著(zhù)抑制膽囊癌細胞GBC-SD的增殖,導致其凋亡增加。PTEN/Akt信號通路的激活可能與之有關(guān)。
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