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			加急見(jiàn)刊
		
        
		

		
		
        
			
        
				
				
				
        
					
					
        
						
						
        創(chuàng  )傷弧菌溶細胞素特定氨基酸序列分析及其人源化單鏈抗體篩選
        
						
        潘振; 呂鵬; 邵淑麗; 畢艷梅; 孫梅; 曲業(yè)敏; 陳英劍; 王明義; 胡成進(jìn)  錦州醫科大學(xué)研究生學(xué)院; 錦州121001; 江蘇大學(xué)生命科學(xué)研究院; 鎮江212013; 威海市立醫院中心實(shí)驗室; 威海264200; 濟南軍區總醫院實(shí)驗診斷科; 濟南250031
        

					
        
					
        摘要：本研究利用生物信息學(xué)方法分析創(chuàng  )傷弧菌（vibrio vulnificus, V.vulnificus）溶細胞素的蓖麻毒素結構域內氨基酸序列并合成多肽,篩選人工合成的單鏈抗體噬菌體文庫Tomlinson I＋J,為創(chuàng  )傷弧菌感染的抗體阻斷治療研究奠定基礎。通過(guò)對未經(jīng)處理的大容量Tomlinson I＋J噬菌體文庫進(jìn)行3輪特異性親和篩選,從中篩到特異性結合溶細胞素多肽的克隆,命名為scFv-D2,經(jīng)氨基酸序列分析驗證其含有完整的人源化抗體重鏈和輕鏈可變區。將scFv-D2克隆轉化E.coli HB2151并誘導表達,用ELISA方法檢測其可溶性scFv片段與溶細胞素毒性多肽的結合活性。結果顯示從Tomlinson I＋J文庫成功篩選出一株具有結合活性的人源化噬菌體單鏈抗體,可用于創(chuàng  )傷弧菌感染抗體阻斷治療策略的研究。
        
					
        注: 保護知識產(chǎn)權,如需閱讀全文請聯(lián)系現代免疫學(xué)雜志社
        
				
        
				

			
        
		
        

		
		

	
        

	
	
	
	
	
	
	
	


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