微小RNA-7基因敲減對LPS誘導的腦部炎癥的影響
摘要:為研究微小RNA-7(microRNA-7, miR-7)基因敲減(knock down, KD)對LPS誘導的腦部炎癥的影響并探討其意義,課題組用LPS腹腔注射(2.5mg/kg體質(zhì)量)WT小鼠建立腦部炎性損傷模型;HE染色觀(guān)察小鼠腦組織病理學(xué)變化,real-time PCR探針?lè )z測腦組織中miR-7的表達變化;進(jìn)一步,用LPS腹腔注射(2.5mg/kg體質(zhì)量)WT小鼠和miR-7KD小鼠;12h后,HE染色觀(guān)察小鼠腦組織病理學(xué)變化;real-time PCR檢測腦組織中炎性細胞因子IL-6、TNF-α和TGF-β的mRNA變化水平;ELISA檢測腦組織中炎性細胞因子IL-6、TNF-α和TGF-β的變化水平;Western blotting檢測信號通路Akt和p-Akt以及炎性信號通路NF-κB和p-NF-κB的表達變化。結果顯示小鼠炎性損傷模型腦組織中,HE示W(wǎng)T小鼠在注射LPS后,腦組織中炎性細胞浸潤顯著(zhù)增多且miR-7的表達水平顯著(zhù)升高(P〈0.01);HE結果示miR-7 KD小鼠腦組織中炎性細胞浸潤較WT小鼠顯著(zhù)增多;real-time PCR結果示促炎細胞因子IL-6(P〈0.01)和TNF-α(P〈0.01)的表達水平均顯著(zhù)升高,而抑炎細胞因子TGF-β(P〈0.01)的表達水平顯著(zhù)降低;ELISA結果顯示,促炎細胞因子IL-6(P〈0.01)和TNF-α(P〈0.01)的表達水平均顯著(zhù)升高,而抑炎細胞因子TGF-β的表達水平顯著(zhù)降低(P〈0.01); Western blotting結果示miR-7 KD模型小鼠腦組織Akt和p-Akt表達沒(méi)有明顯變化,NF-κB(P〈0.05)和p-NF-κB(P〈0.01)表達均明顯增加。由此miR-7基因敲減顯著(zhù)促進(jìn)了腦組織炎性損傷的發(fā)生,與NF-κB信號通路傳遞改變相關(guān),本研究為后續深入探討miR-7在腦部炎癥相關(guān)疾病的發(fā)生機制中的作用提供了前期實(shí)驗基礎。
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