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			加急見(jiàn)刊
		
        
		

		
		
        
			
        
				
				
				
        
					
					
        
						
						
        聚乙二醇定點(diǎn)修飾β-乳球蛋白谷氨酰胺殘基條件優(yōu)化及其對蛋白抗原性的影響
        
						
        羅舜菁; 甘克明; 陸旭麗; 成娜娜; 劉成梅  南昌大學(xué)食品科學(xué)與技術(shù)國家重點(diǎn)實(shí)驗室; 江西南昌330047
        

					
        
					
        摘要：采用谷氨酰胺轉氨酶(TG酶)催化聚乙二醇(PEG)定點(diǎn)修飾技術(shù)對β-乳球蛋白(β-LG)的谷氨酰胺殘基進(jìn)行修飾,探究其對蛋白抗原性的影響。通過(guò)SDS-PAGE結合凝膠過(guò)濾色譜對修飾產(chǎn)物的修飾率進(jìn)行分析,通過(guò)優(yōu)化得最佳修飾條件為pH 7.0,溫度25℃,β-LG與PEG摩爾比1:15,TG酶與β-LG質(zhì)量比3:1,緩沖液中乙醇添加量25%(體積分數),該條件下修飾率為60.17%。采用陽(yáng)離子交換色譜對修飾產(chǎn)物進(jìn)行分離純化,SDS-PAGE分析顯示,純化得到的修飾產(chǎn)物表觀(guān)分子量在28kDa左右,為PEG單修飾產(chǎn)物。反相高效液相色譜分析結果表明,修飾產(chǎn)物均一,無(wú)其它位置異構體存在。間接競爭ELISA測定結果表明,經(jīng)PEG修飾后β-LG的抗原性顯著(zhù)降低,降低率為59.04%。
        
					
        注: 保護知識產(chǎn)權,如需閱讀全文請聯(lián)系食品與機械雜志社
        
				
        
				

			
        
		
        

		
		

	
        

	
	
	
	
	
	
	
	


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