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			加急見(jiàn)刊
		
        
		

		
		
        
			
        
				
				
				
        
					
					
        
						
						
        利用RNA干擾技術(shù)沉默稻縱卷葉螟幾丁質(zhì)合成酶A基因
        
						
        李嬌; 杜娟; 李尚偉  貴州大學(xué)昆蟲(chóng)研究所貴州山地農業(yè)病蟲(chóng)害重點(diǎn)實(shí)驗實(shí); 貴州大學(xué)昆蟲(chóng)資源開(kāi)發(fā)利用特色重點(diǎn)實(shí)驗室
        

					
        
					
        摘要：稻縱卷葉螟(Cnaphalocrocis medinalis)是一種主要的水稻害蟲(chóng),幾丁質(zhì)合成酶是昆蟲(chóng)體內幾丁質(zhì)合成通路中的一個(gè)關(guān)鍵酶,在昆蟲(chóng)生長(cháng)發(fā)育中具有重要作用,是控制害蟲(chóng)的理想靶標。本文采用RNA干擾(RNAi)技術(shù),以稻縱卷葉螟幾丁質(zhì)合成酶A基因(CmCHSA)為靶標,設計兩個(gè)靶位點(diǎn)CmCHSA-I和CmCHSA-II,在體外分別合成其雙鏈RNA(dsRNA),用顯微注射法導入3齡幼蟲(chóng)體內,然后通過(guò)表型觀(guān)察和熒光定量PCR(RT-q PCR)檢測干擾效應。結果表明,注射兩種dsRNA后縱卷葉螟對水稻的取食明顯下降,生長(cháng)發(fā)育阻滯,蟲(chóng)體變小變黑和畸形,有的出現死亡。RT-q PCR表明,注射CmCHSA-I和CmCHSA-II兩種dsRNA在96 h后,CmCHSA的表達量相比對照分別下降了59%和64%。注射CmCHSA-I和CmCHSA-II兩種dsRNA 7 d后,稻縱卷葉螟的死亡率分別為80%和83.33%,與對照組相比,分別增加了66.67%和70%。本研究用注射法RNAi技術(shù)成功實(shí)現了對稻縱卷葉螟幾丁質(zhì)合成酶A基因的沉默,為利用該技術(shù)研究昆蟲(chóng)基因的功能,以及通過(guò)轉基因RNAi技術(shù)防治稻縱卷葉螟奠定了基礎。
        
					
        注: 保護知識產(chǎn)權,如需閱讀全文請聯(lián)系貴州大學(xué)學(xué)報雜志社
        
				
        
				

			
        
		
        

		
		

	
        

	
	
	
	
	
	
	
	


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